Terapia Epigenómica en la enfermedad cerebrovascular hemorrágica

Tema: La metilación del miARN m6A mediada por metiltransferasa 3 promueve la formación de gránulos de estrés oxidativo en la etapa inicial del accidente cerebrovascular

Mecanismo epigenómico: Metilación de mi-ARN 335

Como se lo hizo: In vitro

1. Cultivo de células neuronales de la corteza de roedores neonatales y de células PC12
2. Sometimiento del cultivo a condiciones de lesión de oxígeno-glucosa e inducción de infarto
3. Mediante sistema CRISP-CAS 9 se insertaron los plásmidos pCDH-CMV-METTL3 para expresar la función de la proteína metiltransferasa 3
4. Transfección del miRNA 335 homotípico a las células del cultivo
5. Técnica de inmunofluorescencia de doble marcado para antígeno intracelular de células T (TIA1) y para la proteína 1 ligadora a proteína activadora de GTPasa (G3BP1)
6. Extracción de proteínas y RNA de las células del cultivo para analizar por RT-PCR

Resultados:

• La metilación a través de la enzima METTL3 aumenta la producción y maduración de miR- 335 en un 59.5% en las células cultivadas, promoviendo la formación de SG y reduce el nivel de apoptosis de las neuronas y células lesionadas
• La inmunofluorescencia demostró la formación de gránulos de estrés en un 57.6% en las células cultivadas
• El mi-ARN 335 degrada el ARNm del factor de terminación de la traducción eucariota (Erf1), conllevando a un arresto de la traducción y forma los gránulos de estrés
• Los gránulos de estrés son importantes al detener la traducción de importantes proteínas y ARNm, ya que los protege durante la etapa aguda del accidente cerebrovascular

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: 

1) Si W, Li Y, Ye S, Li Z, Liu Y, Kuang W, et al. Methyltransferase 3 mediated miRNA m6A methylation promotes stress granule formation in the early stage of acute ischemic stroke. Front Mol Neurosci [Internet]. 2020 [citado el 1 de septiembre de 2024];13. Disponible en: http://dx.doi.org/10.3389/fnmol.2020.00103